应用基于适配器连接介导的等位基因特异性扩增法检测LRRK2基因的单核苷酸多态性

目的：应用基于适配器连接介导的等位基因特异性扩增法（Adapter Ligation—mediated Allele-specific Amplification,简称ALM-ASA）技术,检测与帕金森病（PD）发病相关的LRRK2基因中的4个SNP位点（6055G〉A,7153G〉A,4321C〉T和2264C〉T）,探讨该法用于筛查帕金森病相关SNP位点的可行性,研究多个SNP住点同时检测的准确性和可靠性。方法：运用ALM—ASA法原理,改进使用多重PCR法代替单一预扩增法,使用4对引物在单管中预扩增含所待测SNP位点的四段片段,通过酶切、酶连和PCR特异性扩增检测判断SNP的类型。经PCR体外定点突变实验制备的相应位点的突变阳性片段,检验方法的准确性和可靠性。结果：采用该法成功测定了20名PD病人和20名健康中国人的LRRK2基因中最受关注的4个SNP位点的多态性。并随机对其中10分样本的检测结果以测序法检测进行验证,结果完全一致。结论：ALM-ASA法极大提高了PCR反应的特异性,是一种准确、可靠,且费用低廉的SNP筛查方法,可推广应用于临床和实验室进行与PD有关的单核苷酸多态性的筛查检测。     

帕金森病患者睡眠障碍与脑电图活动、神经心理学指标和健康相关生活质量的关系研究

摘要 目的：研究帕金森病（PD）患者睡眠障碍与脑电图活动、神经心理学指标和健康相关生活质量的关系。方法：选择我院2018年5月～2021年5月收治100例PD患者。将其根据匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）评分的差异分作睡眠障碍组（PSQI评分＞7分）68例及无睡眠障碍组（PSQI评分≤7分）32例。比较两组脑电图活动、神经心理学指标以及39项帕金森病生活质量调查表（PDQ39）评分,并分析PSQI评分与脑电图活动、神经心理学指标及PDQ39评分的相关性。结果：睡眠障碍组的δ波和θ波相对功率值高于无睡眠障碍组,而β1、β2两个频段的相对功率值低于无睡眠障碍组（P＜0.05）;睡眠障碍组脑电图轻度异常、中度异常以及重度异常的患者比例高于无睡眠障碍组,而脑电图正常的患者比例低于无睡眠障碍组（P＜0.05）。睡眠障碍组蒙特利尔认知评估中文量表（MoCA）评分低于无睡眠障碍组,而汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分均高于无睡眠障碍组（P＜0.05）。睡眠障碍组PDQ39各项目评分及总分均高于无睡眠障碍组（P＜0.05）。经Pearson及Spearman相关性分析可得：PD患者的PSQI评分与脑电图异常程度、HAMA评分、HAMD评分及PDQ39评分均呈正相关,而与MoCA评分呈负相关（P＜0.05）。结论：睡眠障碍可能对PD患者认知功能造成损害,加剧焦虑、抑郁等负性情绪,并降低其健康相关生活质量,监测脑电图活动可在一定程度上判断PD患者睡眠障碍严重程度。